Тромбовазим: результаты доклинических и клинических исследований

Тромбовазим: результаты доклинических и клинических исследований

Тромбовазим: результаты доклинических и клинических исследований

История создания нового отечественного лекарственногопрепарата Тромбовазим® насчитывает более 30 лет. Идея полученияпрепарата, лизирующего некротические массы и фибрин, принадлежит коллективуученых под началом академика РАН, лауреата Государственной и Ленинской премийР.И.

Салганика. Создание препарата стало возможным в результате сотрудничестваученых-физиков, под руководством доктора физико-математических наук, профессораВ. Л.

Ауслендера (Институт ядерной физики имени Будкера СО РАН) иисследователей отдела молекулярной генетики Института цитологии и генетикиСибирского отделения Академии наук под руководством доктора медицинских наук,профессора А.М. Гончара (Институт Цитологии и Генетики СО РАН).

Впервые дляиммобилизации биомолекул на полимерахмалой и средней молекулярной массы была использована технология радиационногосинтеза.

Иммобилизация белковых молекул преследует две важнейшиецели: существенно снижает патогенность белков высокой молекулярной массы,устраняя аллергогенность и иммунотоксичность.

С помощью технологии электронно-лучевой иммобилизации происходитсшивка биомолекулы с полиэтиленоксидом 1500 ПЭО (связи как электростатические,так и ковалентные). В результате протеазы оказываются словно в муфте из ПЭО.

Препарат, созданный на основе радиационного синтеза, представлялсобой иммобилизированные на полиэтиленоксиде бактериальные ферменты – субтилизины (молекулярная масса27,5-31 кДа).

Субтилизины характеризуются высокой активностью к денатурированным и нерастворимым белкам.

В кровотокетакая иммобилизированная молекула не реагирует на нативные белки, существующиев виде глобулы, а воздействует только на нерастворимые белки (полимер в видеэуглобулинового сгустка). Наряду с фибринолитическим действием происходит ипротеолиз клеточного детрита.

Практическое воплощение идеи в жизнь стало возможным послепривлечения средств частного капитала группыкомпаний «СФМ». Итогом сотрудничества ученых Института ядерной физики им.

Будкера, Института Цитологии и Генетики СО РАН и частного капитала сталосоздание в 2000 году научно-производственнойкомпании – Сибирский Центр Фармакологии и Биотехнологии (ЗАО «СЦФБ»). Былиотработаны и внедрены оптимальные технологические режимы производствапрепаратов на основе субтилизинов.

Открылась перспектива создания не толькопринципиально новых фармацевтических композиций, но и совершенно революционногопрепарата – энтерального тромболитика с противовоспалительными и цитопротективнымисвойствами.

Сегодня СЦФБ – фабрика сполным технологическим циклом производства биотехнологических препаратов постандартам качества GMP.

Это не только производственнаяплощадка, оснащенная самым современным оборудованием, в его состав входитмощная лабораторная база, где проводятся доклинические исследования и валидациятехнологических процессов по международным нормам лабораторной и производственнойпрактики.

В настоящий момент благодаря научно-производственным мощностям СЦФБсоздан первый отечественный тромболитик Тромбовазим®,который является оригинальным препаратом с уникальными свойствами. Тромбовазим®отличается высокой устойчивостью, чистотой, соответствующей самым высокимтребованиям, возможностью длительного хранения и, самое главное, практическиполным отсутствием побочных эффектов. 

2. КРАТКИЙ ОБЗОР ПРОВЕДЕННЫХДОКЛИНИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ ПРЕПАРАТА ТРОМБОВАЗИМ®

Доклинические испытания Тромбовазима® проводились вИнституте фармакологии СО РАМН (г. Томск), Институте цитологии и генетики СОРАН (г. Новосибирск), НИИ биологии и биофизики (г.

Томск), Федеральномакадемическом центре гемостаза (г. Барнаул), Научном центре клинической иэкспериментальной медицины СО РАМН (г. Новосибирск), Институте физиологии СОРАМН (г.

Новосибирск), Институте клинической и экспериментальной лимфологии СОРАМН (г. Новосибирск). 

2.1. Оценкатоксичности Тромбовазима®

Исследование остройтоксичности проводилось при внутривенном, внутрибрюшинном и энтеральномиспользовании Тромбовазима®. На основании анализа величин параметровтоксичности Тромбовазим® относится к четвертому классу.

Исследование хроническойтоксичности: Тромбовазим® вводили внутрибрюшинно ежедневно в течение 14 дней. У подопытных животных не наблюдалось токсическоговоздействия на внутренние органы и функциональные системы организма, не отмечалосьпатологических изменений основных показателей форменных элементов периферическойкрови и средних величин биохимических показателей.

При внутривенном капельномвведении Тромбовазима® в течение 14 дней у подопытных животных не наблюдалось токсическоговоздействия на внутренние органы и функциональные системы организма, неотмечалось патологических изменений основных показателей форменных элементовпериферической крови и средних величин биохимических показателей. При внутривенном введении  собакам в дозе 20 ЕД/кг в течение 14 днейбыло отмечено, что Тромбовазим® не обладает раздражающим действиемна сосудистую стенку.

Изучение параметров токсичности таблетированной формы проводилось приприеме препарата в течение 30 дней.

Выбранные дозы в 4, 20 и 40 раз превышали сопоставимую суточную дозу накилограмм массы для человека.

Ежедневное введение Тромбовазима® в течение 30 дней не вызывало гибели животных ивыраженных изменений общего состояния, средних величин процента прироста общеймассы, температуры тела.

2.2. Фибринолитическое и антитромботическое действиепрепарата Тромбовазим® in vitro 

Вэкспериментах «in vitro» выявлено прямоедозозависимое фибринолитическоедействие препарата на сгусток фибрина, полученного из очищенногофибрин-мономера.

Механизм действия отличен от действия плазмина, посколькуданный препарат действует нанерастворимые белки, на клеточный детрит, а также препятствует полимеризациифибрин-мономеров.

Тромбовазим® снижает адгезию тромбоцитов in vitro и увеличивает скоростьлизиса эуглобулинового сгустка при внутривенном введении.

2.3. Тромболитическая и антитромботическая активность препарата Тромбовазим® in vivo

Тромболитическая иантитромботическая активность препарата Тромбовазим® in vivo изучалась на моделитромбоза общей сонной артерии хлоридом железа (II).

На первом этапе при внутривенном профилактическом введенииТромбовазима®  внутрибрюшинно за 30 минут до экспериментабыло выявлено, что через 1,5 часа в группе контроля доля животных с полнойокклюзией сонной артерии составила 78%, а в группе Тромбовазима® лишь 20%. Тромбовазим® достоверно уменьшал остаточнуюмассу тромбов через 24 часа.

 Навтором этапе Тромбовазим® вводили через 5 мин. после удаленияхлорида железа внутривенно инфузионно в течение 10 мин. Через 24 часадостоверно и существенно (в 3 раза) снижалась доля животных с полной окклюзиейсонной артерии. Остаточные тромбы при этом были выявлены лишь у трети животных,получивших Тромбовазим®, а в группе контроля тромбы выявлены у 88%животных.

При профилактическом приемеper os (режим дозирования Тромбовазима®следующий:  за 4 часа до эксперимента,через 2 часа после эксперимента, далее 2 раза в сутки) в группе сравнениятолько у одного животного

Источник: http://dnaclub.info/trombovazim-rezultaty-doklinicheskikh-i-klinicheskikh-issledovanii.htm

Интерью с Андреем Бекаревым

Тромбовазим: результаты доклинических и клинических исследований

– Цены на импортные лекарства в аптеках растут. Удастся ли наладить производство российских лекарств и не зависеть от внешнего рынка?

Некоторые препараты производить в России не оправданно, – дешевле привезти сырье из-за рубежа и здесь упаковать (и это формально будет лекарством Российского производства). Однако, есть препараты, которые определяют безопасность, и это уже прерогатива государства регулировать данное направление.

Но не стоит ориентироваться только безопасностью. Разработка новых препаратов – это развитие науки, медицины, создание новых рабочих мест, развитие собственной промышленности. Нам интересно заниматься именно созданием новых оригинальных препаратов.

–  Какие именно оригинальные препараты (собственные) Вы планируете разрабывать? Известно, что разработка нового препарата и доведение его до рынка стоит миллиард долларов. Полагаю, у Вас бюджет поменьше. За счет чего Вы собираетесь уменьшить расходы на доклинические и клинические исследования, чтобы дать сопоставимый результат за меньшие деньги?

В России сейчас разрабатывается 44 новых лекарственных препарата, из которых зарегистрировано 3.  Два из них – это Тромбовазим (один в таблетированной форме, другой – в инъекционной). Разработка новых препаратов – это колоссальные цифры и в деньгах, и по времени.

Минимальный срок разработки оригинального препарата и доведении его до рынка – 10 лет, это связано в том числе с временем проведения доклинических и клинических исследований. Что касается затрат, то здесь часть затрат приходится на разработку, а часть – на продвижение препарата.

 В нашем случае надо понимать, что касается Тромбовазима, – в базе находились разработки, которые велись еще в середине 80-х годов Сибирского отделения наук Советского Союза.  И если считать в том числе и эти затраты, то разработка Тромбовазима обошлась далеко за миллиард долларов.

 Если говорить о существующих затратах, то команда на разработку препаратов – это почти 200 человек. Лабораторные мышки, которые шли на эксперименты, меряются уже не машинами, а вагонами. Все остальное приходится пробивать.

Говорить о какой-то осознанной поддержке государства или чиновников – принципиально не приходится. Все дается с боем, любое продвижение дается с боем.

Экспериментов в пробирке, которые показывали отличные результаты по различным заболеваниям, – огромное количество. Но вот на этапе, когда надо ввести это вещество в живой организм, многие такие разработки уходят в утиль, – потому что не находится решения, каким образом это можно применить.

Например, различные ферменты, которые хорошо действуют в пробирке (например, разрушают тромбы), – они были известны давно. Но как это ввести в человека?  Человек – не пробирка, это живое существо. Если ввести вещество просто в кровоток, – то это совершенно чужеродный белок, который просто вызовет анафилактический шок.

Если ввести через желудок, – ферменты в нем просто разрушаются.

Что касается наших препаратов, то здесь есть некий забавный нюанс. Была разработана именно ТЕХНОЛОГИЯ, которая позволяла создавать новые вещества на основе некоторых уже известных (и в том числе вышедших в утиль) новых молекул.

И эти новые вещества стали уже БИОДОСТУПНЫ для человека, они становятся не-аллергенными и не разрушаются в желудочно-кишечном тракте. По такому принципу был создан, например, Тромбовазим. Это не-химическая технология, суть которой в обработке вещества электронно-лучевым пучком, которые “пришивает” ферменты на полимерную основу.

Обработанное по такой технологии вещество прекрасно всасывается через желудочно-кишечный тракт и сохраняет все свои свойства. 

– Интересует доказательная база по применению Тромбовазима. В инструкции по применению клинические исследования не описаны. В эпоху доказательной медицины на основании чего врач должен выбирать именно Ваш препарат для его единственного зарегистрированного показания в качестве “вспомогательного средства в комплексной терапии хронической венозной недостаточности”. 

В данном вопросе подразумевается пероральная форма выпуска Тромбовазима, там действительно указано “хроническая венозная недостаточность”.

Другая форма   Тромбвазима – внутривенная, и там впрямую описаны тяжелые показания, в том числе и инфаркты, при этом действующее вещество одно и то же.

 Дело в том, что на этапе регистрации препарата существует определенная процедура, и если Вы заявите полный список действия данного лекарственного средства, то по срокам регистрации данного препарата  мы уйдем в некое будущее, которое определяется несколькими десятилетиями: каждое заявленное показание нужно будет подтверждать нужным количеством экспериментов. Поэтому практика такая: берется ОДНО из показаний, оно заявляется, проводятся исследования, получается регистрация, параллельно с этим процессом идут  клинические исследования по остальным показаниям. 

Далее… Нигде, ни в каких инструкциях каких-либо препаратов (в том числе импортных) нет полного описания клинических исследований никаких препаратов, этого не делается в принципе. Более того, если Вы возьмете большинство известных препаратов, в том числе зарубежных, там всегда предлагается поверить на слово.

Тут есть тонкая хитрость, когда говорят про “многотысячные мультицентровые исследования”, как способ доказать, что “наши препараты лучше”.  Показания “многотысячные исследования” бессмысленны, это не более, чем маркетинговая уловка. Где проводятся эти мультицентровые исследования? В основном, это Африка, Латинская Америка.

Есть очень много публикаций, в которых описано, что люди европеоидной, монголоидной, негроидной расы очень часто совершенно по-разному реагируют на препараты.

Если исследования проводились где-то в Африке, то резонный вопрос:  а мы-то тут причем? и почему нужно впрямую переносить результаты на нас?   Это всего лишь маркетинговый ход. 

При этом, есть понятие “статистическая достоверность”. Есть требования, которое выставляет Минздрав по количеству исследований, – мы его полностью выполняем. Клинические исследования предназначены для узких специалистов.

Например, в них разбирались специалисты, которые выдают Свидетельство о регистрации препарата. Само Свидетельство о регистрации являются документом, подтверждающим, что препарат прошел доклинические и клинические испытания.

 Что касается Тромбовазима, то было задокументировано более 10 тысяч случаев применения препарата на практике, препарат уже переведен из рецептурных в безрецептурные препараты.

– Скажите, Андрей, как Вы, человек с экономическим образованием, занимаетесь медицинским вопросом?

Справедливый вопрос, я действительно экономист, кандидат экономических наук, закончил  Новосибирский гос. университет, но  судьба сложилась так, что в свое время туда я попал в физ-мат.школу при университете как химик и биолог, я был победитель олимпиады по химии.

Скажем так, немножко я в этом разбираюсь, и тема эта для меня интересная.  В данных проектах я выступаю как инвестор, а не как разработчик. К этому вопросу я отношусь крайне трепетно, – существует много гораздо более умных людей, которые эту тему хорошо знают, они этим и занимаются.

Мне эта тема просто нравится.

– Кроме Тромбовазима, какие проекты еще планируются?

Есть препараты, которые совсем оригинальными не назовешь, – интерфероны, их целая группа, и есть зарубежные аналоги. Один из интерферонов показал очень хорошие результаты для лечения гепатита С. Для понимания, пару лет назад была сделка, когда приобрели разработку аналогичного интеферона (зарубежного), и сумма сделки измерялась в несколько сотен миллионов долларов.

Источник: https://www.dna-sklad.ru/info/video_bekarev.html

Опыт применения лекарственного препарата Тромбовазим для лечения эстроген-индуцированной хронической венозной недостаточности

Тромбовазим: результаты доклинических и клинических исследований

В патогенезе эстроген-индуцированной хронической венозной недостаточности большое значение имеют тромбообразование и ослабление лимфооттока. Авторы наблюдали пациенток с хронической венозной недостаточностью, принимающих гормональные препараты с целью заместительной терапии или контрацепции.

Прием препарата Тромбовазим, который обладает тромболитической и лимфостимулирующей активностью, положительно влиял на объективный статус пациенток, повышал их толерантность к физическим нагрузкам. Можно рекомендовать использовать этот препарат в превентивной терапии нарушений гемостаза и реологии крови.

Это позволит уменьшить риск сосудистых осложнений, повысит качество жизни женщин на фоне длительного приема гормональной заместительной терапии и гормональных контрацептивов.

Таблица 1. Оценка состояния пациентов по модифицированной шкале СЕАР до и после курса лечения*

Таблица 2. Оценка динамики толерантности к нагрузкам по балльной шкале при хронической венозной недостаточности до и после курса лечения*

Таблица 3. Оценка динамики системы гемостаза до и после курса лечения

Актуальность

Проблема осложнений, возникающих на фоне применения содержащих эстроген препаратов с целью лечения и контрацепции, остается весьма актуальной в современной гинекологии [1, 2]. К наиболее распространенным осложнениям относятся возникновение и прогрессирование хронической венозной недостаточности.

В настоящее время для лечения хронической венозной недостаточности в качестве базисной терапии используются флеботонические препараты [3, 4].

Однако их эффективность ограничивается флеботонической и антиоксидантной фармакологической активностью.

Между тем в патогенезе эстроген-индуцированной хронической венозной недостаточности большое значение имеют тромбообразование и ослабление лимфооттока.

На фармацевтическом рынке России представлен лекарственный препарат Тромбовазим, который обладает тромболитической и лимфостимулирующей активностью.

Фармакологически активным агентом в этом препарате является иммобилизованный на полиэтиленоксиде фермент субтилизин. Накоплен достаточный опыт использования этого препарата при тромботических состояниях и сосудистых заболеваниях.

Препарат отличают выраженная эффективность и хорошая переносимость [5, 6].

В статье представлены результаты применения Тромбовазима у женщин с хронической венозной недостаточностью, возникшей на фоне приема содержащих эстроген препаратов с целью заместительной гормональной терапии и оральной контрацепции.

Цель

Проанализировать параметры эффективности и безопасности терапии препаратом Тромбовазим у женщин с хронической венозной недостаточностью на фоне применения заместительной гормональной терапии и оральной контрацепции.

Задачи

Оценить влияние курсовой дозы Тромбовазима на выраженность симптомов хронической венозной недостаточности.

Оценить показатели гемостаза после проведения терапии Тромбовазимом.

Оценить характер и выраженность нежелательных явлений или реакций, если они наступят в результате приема Тромбовазима.

Краткая характеристика лекарственного препарата Тромбовазим

Тромбовазим представляет собой высокоочищенный ферментный препарат, получаемый в результате иммобилизации на полиэтиленоксиде протеиназ семейства субтилизинов. Препарат включен в группу лекарственных средств, действующих на сердечно-сосудистую систему, и может быть отнесен одновременно к двум подгруппам:

а) средствам, ингибирующим и стимулирующим систему свертывания;

б) средствам, улучшающим кровоснабжение органов и тканей, в подразделе «средства, улучшающие кровоснабжение и метаболизм миокарда».

Тромбовазим увеличивает фибринолитическую активность крови, оказывая прямое фибринолитическое действие. Обладает антитромботическим эффектом. Не снижает уровень фибриногена, тромбоцитов и не влияет на время свертывания и длительность кровотечения. Уменьшает интенсивность реперфузионных повреждений, поскольку обладает противовоспалительным и цитопротективным эффектом.

Препарат выводится из организма почками (80%) и печенью (20%), при приеме per os биодоступность составляет 20%. Не гидролизует нативные белки тканей, не оказывает токсического или местнораздражающего действия, не вызывает аллергических реакций.

Препарат обладает тромболитическим эффектом, обусловленным прямой деструкцией нитей фибрина, образующих основной каркас тромбов. Протеолитическая активность избирательна для белков поврежденных, нежизнеспособных и некротически измененных тканей. Нативные белки живых тканей устойчивы к ферментативному лизису протеаз Тромбовазима.

Отклонений в показателях свертывания крови при однократном и многократном пероральном приеме в терапевтических дозах не наблюдается. Препарат также эффективен в качестве профилактического средства при угрозе развития венозных или артериальных тромбозов.

Обладает антиагрегант­ными и фибринолитическими свойствами, является ангиопротектором и корректором микроциркуляции, а также проявляет противовоспалительные и анальгезирующие свойства. Снижает интенсивность ишемических и реперфузионных осложнений.

В рекомендуемых терапевтических дозах может использоваться в качестве высокоэффективного профилактического и лечебного средства при ишемических и реперфузионных повреждениях различных органов. Доказано, что препарат обладает цитопротективной активностью, в частности кардиопротективной. Имеются данные о противовоспалительной активности препарата, его позитивном влиянии на трофические изменения ишемизированных тканей [7].

Материал и методы

В группу наблюдения было включено 73 женщины с хронической венозной недостаточностью, принимающих гормональные препараты с целью заместительной терапии или контрацепции. Средний возраст составил 39,6 ± 7,5 года, масса тела – 69,4 ± 11 кг, рост – 167,7 ± 6,14 см (распределение данных нормальное, метод анализа параметрический, t-критерий Стьюдента).

Тромбовазим назначался в соответствии с инструкцией по медицинскому применению в суточной дозе 1600 ЕД (по одной капсуле два раза в день). Продолжительность лечения – 12 дней. Курсовая доза – 19 200 ЕД.

Методы и порядок контроля исследуемых признаков

  • оценка клинической симптоматики в нижних конечностях по шкале СЕАР до начала исследования и на 12–14-е сутки;

  • оценка толерантности к нагрузкам по балльной шкале при хронической венозной недостаточности до начала исследования и на 12–14-е сутки;

  • оценка показателей гемостаза, отражающих процессы тромбообразования, до начала лечения и на 12–14-е сутки;

  • данные о безопасности на момент окончания курса терапии.

Исследования гемостаза проводились с помощью современных стандартизированных коагулологических наборов на коагулометре Sysmex CA-50 (Япония), лазерном анализаторе микрочастиц «Ласка-БИО» (НПФ «Люмекс», Санкт-Петербург, Россия).

Для статистической обработки данных использовалась программа Statistica 6.0. Была произведена проверка количественных признаков на соответствие закону нормального распределения. Для этого использовался критерий Шапиро – Уилка как наиболее надежный [8].

Признаки, у которых распределение данных соответствовало нормальному, анализировались с помощью параметрического метода – t-критерия Стьюдента для зависимых групп.

Признаки, где распределение не соответствовало нормальному, анализировались непараметрическими методами с использованием критериев Вилкоксона для зависимых групп. Значения признавались достоверными при р < 0,05.

В качестве параметров безопасности фиксировались следующие нежелательные явления: смерть, кровотечение, аллергия и другое (с конкретным описанием).

Результаты

Была проведена оценка состояния пациентов по модифицированной шкале СЕАР в динамике (табл. 1). После курса лечения выявлены статистически значимые изменения таких признаков, как боль, отеки и субъективное ощущение распирания. Отмечалась положительная динамика показателей по модифицированной шкале СЕАР.

Оценивалась толерантность к нагрузкам (усталость ног после интенсивных физических нагрузок и при повседневном образе жизни) по балльной шкале (табл. 2). В исследуемой группе пациенток толерантность к физическим нагрузкам повышалась, различия до и после лечения были статистически значимы.

Для признаков, у которых распределение данных соответствовало нормальному (активированное частичное тромбопластиновое время, тромбиновое время), использовался параметрический метод – t-критерий Стьюдента для зависимых групп.

Для протромбинового времени, международного нормализованного отношения, фибриногена, растворимых фибрин-мономерных комплексов, D-димеров, фибринолиза, плазминогена, агрегации с коллагеном (распределение, отличное от нормального) применялся статистический критерий Вилкоксона для зависимых групп (табл. 3).

Статистически достоверной была нормализация показателей свертывающей системы крови (протромбинового времени, международного нормализованного отношения, агрегации с коллагеном), что подтверждает снижение влияния на один из основных факторов тромбообразования.

Результаты статистического анализа показали отчетливую тенденцию изменения в оценке динамики уровня растворимых фибрин-мономерных комплексов и D-димеров, которые являются наиболее информативными показателями тромбинемии и активации внутрисосудистого свертывания.

Так, уровень растворимых фибрин-мономерных комплексов до начала приема Тромбовазима превышал нормативный показатель в среднем в 1,83 раза, а уровень D-димеров имел тенденцию к увеличению в 1,53 раза в сравнении с физиологической нормой.

После приема Тромбовазима достоверно снизился уровень маркеров тромбинемии.

Что касается безопасности терапии, то в группе наблюдения нежелательных явлений отмечено не было.

Обсуждение результатов

Можно сказать, что при эстроген-индуцированной хронической венозной недостаточности применение лекарственного препарата Тромбовазим позволяет добиться положительной динамики даже после одной курсовой дозы.

Отмечено позитивное влияние на объективный статус пациенток по показателям модифицированной шкалы СЕАР, повышение у них толерантности к физическим нагрузкам. Препарат продемонстрировал благоприятное соотношение эффективности и безопасности.

Исследование гемостаза показало, что препарат оказывал антиагрегантное действие, улучшал реперфузионные показатели микроциркуляторного бассейна.

Заключение

Тромбовазим является эффективным и безопасным средством лечения хронической венозной недостаточности и дисгормональных тромбофилических состояний у женщин на фоне длительного приема гормональной заместительной терапии и гормональных контрацептивов. Препарат может быть рекомендован для включения в программу превентивной терапии нарушений гемостаза и реологии крови, что позволит уменьшить риск сосудистых осложнений и повысить качество жизни женщин [9].

  • КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: венозная недостаточность, гормональная терапия, Тромбовазим

Источник: https://umedp.ru/articles/opyt_primeneniya_lekarstvennogo_preparata_trombovazim_dlya_lecheniya_estrogenindutsirovannoy_khronich.html

МетодМедика